在执业医师考试的备考冲刺阶段，对于医学免疫学中的 ELISA 技术这一重要考点，需要我们深入理解和掌握。
ELISA 技术包括双抗体夹心法（测抗原）和间接法（测抗体）。
一、双抗体夹心法（测抗原）
原理：将特异性抗体包被于固相载体表面，然后加入待测样本，如果样本中存在抗原，抗原与固相抗体结合。接着加入酶标记的特异性抗体，形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体的复合物。最后加入底物，通过酶催化底物产生颜色反应，颜色的深浅与抗原的含量成正比。
操作步骤：
1. 包被：将特异性抗体用包被缓冲液稀释后加入酶标板孔中，4℃过夜或 37℃孵育数小时，使抗体牢固吸附于孔壁。
2. 封闭：用封闭液封闭酶标板上未结合抗体的孔壁，防止非特异性结合。
3. 加样：加入待测样本，37℃孵育一定时间，使抗原与固相抗体充分结合。
4. 加酶标抗体：加入酶标记的特异性抗体，37℃孵育。
5. 显色：加入底物溶液，显色后在酶标仪上读取吸光度值。
二、间接法（测抗体）
原理：将已知抗原包被于固相载体表面，加入待测样本，如果样本中存在相应抗体，抗体与抗原结合。然后加入酶标记的抗抗体（二抗），形成固相抗原 - 抗体 - 酶标抗体的复合物，最后通过底物显色检测。
操作步骤与双抗体夹心法类似，只是在加入样本前是包被抗原。
三、方法学特点
1. 灵敏度：间接法由于使用了酶标记的二抗，可以检测多种与固相抗原结合的抗体，灵敏度相对较高。双抗体夹心法需要两个特异性抗体，对技术和操作要求较高，灵敏度稍逊于间接法。
2. 特异度：双抗体夹心法因为使用了两个特异性抗体，与抗原的结合更紧密，特异度较高。间接法可能会受到交叉反应的影响，特异度相对略低。
四、适用场景
双抗体夹心法适用于检测可溶性抗原，如病原体抗原、激素、肿瘤标志物等。间接法常用于检测抗体，如自身免疫性疾病中的自身抗体、传染病中的特异性抗体等。
在历年真题中，经常会出现关于这两种方法特点和适用场景的题目。例如：“以下哪种情况适合使用双抗体夹心法检测？A. 检测血清中的某种抗体 B. 检测尿液中的某种抗原 C. 检测组织中的某种蛋白质 D. 检测细胞表面的某种抗原”。对于这类题目，我们需要清楚每种方法的原理和特点，从而准确判断适用场景。
总之，在备考医学免疫学的 ELISA 技术时，要深入理解双抗体夹心法和间接法的原理、操作步骤、方法学特点以及适用场景，并通过做真题不断巩固和强化记忆，提高解题能力。
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