根据《上市公司非公开发行股票实施细则》《上海证券交易所科创板股票发行与承销业务指引》和《上海证券交易所科创板股票发行与承销实施办法》，下列机构中，必须使用自有资金参与公司股票发行的有(  )。
Ⅰ．信托公司参与认购上市公司非公开发行股票
Ⅱ．保险公司参与认购上市公司非公开发行股票
Ⅲ．证券投资基金参与科创板公司首次公开发行战略配售股票
Ⅳ．保荐机构相关子公司参与科创板首次公开发行股票跟投

本题考察关于股票发行中必须使用自有资金的机构的知识点。
Ⅰ项，根据《上市公司非公开发行股票实施细则》第9条规定，信托公司只能以自有资金认购上市公司非公开发行股票，因此信托公司参与认购必须使用自有资金。
Ⅱ项，《科创板首次公开发行股票注册管理办法（试行）》第50条规定，并未特别强调保险公司必须使用自有资金参与认购。
Ⅲ项，《上海证券交易所科创板股票发行与承销实施办法》第17条第2款规定，战略投资者参与股票配售应使用自有资金，但不包括证券投资基金。
Ⅳ项，根据《上海证券交易所科创板股票发行与承销业务指引》第17条规定，保荐机构相关子公司跟投使用的资金应当为自有资金。
综上所述，只有Ⅰ和Ⅳ符合规定，所以答案是B。